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lorenzo.zolfanelli93 4 years ago
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@ -577,7 +577,7 @@ eccitazione in uscita dall'obiettivo.
& $\lambda_{centr}: \SIlist{446;510;581;703}{\nm}$
& FF01-446/510/581/703\\
\end{tabular}
\caption{Caption}
\caption{Lista delle componenti ottiche}
\label{tab:optical_components}
\end{sidewaystable}

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chapters/3-methods.tex View File

@ -433,7 +433,14 @@ di rilevare eventi di durata confrontabile con il tempo di rilassamento
diffusivo si utilizza una scheda elettronica programmabile dedicata,
di tipo FPGA (\textit{Field Programmable Gate Array}), per controllare
il ciclo di retroazione.
In questo modo è possibile raggiungere una frequenz
In questo modo è possibile leggere i valori di posizione e aggiustare
il segnale generato per gli AOM a una frequenza di \SI{200}{\kHz}, pari
al dobbio della larghezza di banda dei diodi usati nei QPD.
La scheda FPGA (National Instruments) è stata programmata con un codice
progettato in ambiente LabVIEW, e comunica con un apposito programma
in esecuzione sul PC di controllo dell'esperimento per configurare i
parametri sperimentali e memorizzare i tracciati (\texttt{Force-Clamp Control}).
\section{Saggio a tre sfere}
\label{sec:three-beads}
@ -478,10 +485,61 @@ applicata sul legame è pari a quella selezionata}.
\label{fig:three_beads}
\end{figure}
In figura \ref{fig:three_beads} è rappresentato lo schema realizzato
\section{Fluorescenza di singola molecole}
In figura \ref{fig:three_beads} è rappresentato lo schema realizzato.
In mancanza di legame il sistema continuerebbe a muovere le trappole
indefinitamente fino a raggiungere regioni dove l'efficienza
di intrappolamento non è più sufficiente oppure a esaurire l'intervallo
di deflessioni ottenibili con gli AOM.
Per evitare questo si decide di limitare gli spostamenti massimi
delle trappole in un intervallo di qualche \si{nm}, implementando
un sistema di ``riflessione'': quando il fascio che sta tentando di
applicare la forza selezionata $\Delta F$ si è spostato di un determinato
cammino massimo, si scambia il ruolo delle due trappole e si applica
un comanda un incremento di forza $-\Delta F$ sulla trappola che prima
era passiva. In questo modo la tensione applicata sul sistema meccanico
è uguale in modulo e opposta in verso. Inoltre il sistema può continuare
ad acquisire dati autonomamente per lunghi intervalli di tempo senza
la necessità di interventi manuali.
Uno schema di questo tipo è già stato utilizzato per lo studio
dell'interazione di motori molecolari (come la \textit{miosina}) e
filamenti di \textit{actina}.
Nello studio delle giunzioni cellulari sono ipotizzabili numerosi
esperimenti in cui l'interazione di uno o più fattori coinvolti
nel complesso delle adesioni sia fatti interagire con un filamento
di actina teso tra le due trappole.
\section{Fluorescenza di singola molecola.}
\label{sec:single_molecule_fluorescence}
L'apparato sperimentale consente, in parallelo all'esecuzione di
un esperimento di \textit{force-clamp}, di eccitare la fluorescenza
del campione alle lunghezze d'onda di \SIlist{488;532;635}{\nm}.
Anche il sistema di stabilizzazione attiva (che usa una
transilluminazione a lunghezze d'onda $ >\SI{700}{\nm}$ può essere
mantenuto attivo contemporaneamente, visto che le finestra
di eccitazione e emissione scelte sono a lunghezze d'onda inferiori.
I filtri dicroici utilizzati (vedi tabella \ref{tab:optical_components})
permettono di osservare radiazione di fluorescenza emessa nelle
finestre riportate in tabella \ref{tab:fluo_lambda}:
\begin{table}[ht]
\centering
\begin{tabular}{c c}
\toprule
$\lambda$ eccitazione & $\lambda$ emissione \\
\midrule
\SI{488}{\nm} & \SIrange{502.5}{518.5}{\nm} \\
\SI{532}{\nm} & \SIrange{550}{613}{\nm} \\
\SI{635}{\nm} & \SIrange{663}{700}{\nm} \\
\bottomrule
\end{tabular}
\caption{Lunghezze d'onda di eccitazione e emissione compatibili con l'apparato sperimentale.}
\label{tab:fluo_lambda}
\end{table}
\section{TIRF e illuminazione a modi di galleria}
\label{sec:gallery_mode}

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