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@ -49,7 +49,7 @@ schemi di microscopia e manipolazione: |
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\includegraphics[width=1.1\linewidth]{images/microscope.pdf} |
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\includegraphics[width=1.1\linewidth]{images/microscope.pdf} |
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\caption{Schema delle componenti principali del microscopio e dei percorsi |
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\caption{Schema delle componenti principali del microscopio e dei percorsi |
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ottici utilizzati. A: luce trasmessa, B: pinzette ottiche, C: epifluorescenza.} |
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ottici utilizzati. A: luce trasmessa, B: pinzette ottiche, C: epifluorescenza.} |
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\label{fig:my_label} |
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\label{fig:microscope} |
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\end{figure} |
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\end{figure} |
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Per evitare interferenze tra i tre schemi è stato necessario |
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Per evitare interferenze tra i tre schemi è stato necessario |
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@ -60,8 +60,45 @@ e filtri. |
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L'illuminazione a luce trasmessa è realizzata sfruttando una |
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L'illuminazione a luce trasmessa è realizzata sfruttando una |
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sorgente LED con spettro di emissione centrato a \SI{780}{\nm}, |
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sorgente LED con spettro di emissione centrato a \SI{780}{\nm}, |
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le due pinzette ottiche vengono realizzate partendo da un laser |
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le due pinzette ottiche vengono realizzate partendo da un laser |
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a stato solido Nd:YAG con emissione a \SI{1064}{\nm}. Per la |
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microscopia di fluorescenza si usano per l'eccitazione sorgenti |
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laser a diodo alle lunghezze d'onda di \SIlist{488;532;635}{\nm} e |
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l'emissione dei fluorofori fino a \SI{700}{\nm} può essere raccolta |
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e disaccopiata dall'illuminazione a luce trasmessa. |
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\section{Microscopio e traslatori} |
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Gli elementi ottici e optomeccanici principali che costituiscono |
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il microscopio sono assemblati su una struttura metallica |
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personalizzata, realizzata dall'Officina Meccanica del LENS. |
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Questa struttura è poggiata su un tavolo ottico attraverso quattro |
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elastomeri termoplastici (Newport NewDamp™) in grado di attenuare |
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significativamente le vibrazioni meccaniche. |
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Il tavolo ottico (Melles-Griot) è a sua volta isolato dal pavimento |
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attraverso un sistema di smorzamento attivo ad aria compressa. |
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Una miscela in soluzione acquosa delle varie molecole necessarie |
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per gli esperimenti viene caricata in una camera di reazione |
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realizzata tra due vetrini (portaoggetti e coprioggetti). |
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Il preparato così assemblato viene fissato nel microscopio, attraverso |
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quattro viti, su un tavolino traslatore (il \textit{traslatore corto raggio} in figura \ref{fig:microscope}), trovandosi quindi tra il |
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\textit{condensatore} e l'\textit{obiettivo}. |
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La posizione del campione rispetto al centro del percorso ottico |
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può essere modificata attraverso due traslatori controllati |
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elettronicamente, uno di tipo piezoelettrico (Physik Instrumente, ??) |
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per spostamenti veloci e con precisione nanometrica, con una corsa di |
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\SI{100}{\um} per asse, e uno di tipo motore passo-passo |
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(Steinmeyer, KDT105-PM) per spostamenti macroscopici con una corsa di \SI{50}{\mm} per asse. |
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Il piano focale può essere modificato variando la posizione |
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dell'obiettivo, grazie a un posizionatore verticale piezoelettrico |
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(Physik Instrumente, PIFOC™ ??) con con una corsa di \SI{400}{\um} |
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e risoluzione nanometrica. |
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I due pos |
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\section{Force-clamp} |
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\section{Force-clamp} |
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