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chapters/4-results.tex

@@ -1,4 +1,4 @@
-\chapter{Conclusione}
+\chapter{Conclusione e prospettive future}
 \label{cap:results}
 
 Nello svolgimento di questo lavoro di tesi è stata esplorata la possibilità
@@ -6,8 +6,8 @@ di utilizzare tecniche di microscopia e manipolazione ottica avanzate e
 ultraveloci per caratterizzare le proprietà meccaniche di complessi di
 biomolecole interagenti.
 
-Queste proprietà, in particolare la dipendenza delle caratteristiche dinamiche
-delle interazioni da sollecitazioni meccaniche esterne e la loro modulabilità,
+Queste proprietà, in particolare la modulabilità delle proprietà dinamiche
+delle interazioni attraverso l'applicazione di stimoli meccanici controllati,
 sono alla base della \textit{meccanotrasduzione}, ovvero di ogni processo
 che consente la traduzione di un segnale di tipo meccanico in segnali
 biochimici capaci di alterare il funzionamento di cellule e organismi.
@@ -39,7 +39,7 @@ l'eventuale attivazione di cofattori terzi interagenti può essere rilevata
 grazie alla microscopia di fluorescenza.
 
 Correlando temporalmente queste due informazioni in un unico esperimento, è
-possibile caratterizzare e quantificare una serie di meccanismi fondamentali
+possibile caratterizzare e quantificare un insieme di meccanismi fondamentali
 per la meccanotrasduzione molto più ampio di quello esplorabile con le
 due tecniche separatamente.
 
@@ -65,7 +65,53 @@ raggiungibili in un apparato di spettroscopia force-clamp isolato.
 
 Inoltre, è stata esplorata la possibilità di sfruttare le proprietà ottiche
 dei materiali usati negli esperimenti per incrementare il rapporto
-segnale/rumore in microscopia di fluorescenza.
+segnale/rumore in microscopia di fluorescenza. A questo riguardo, ulteriori
+approfondimenti sulla possibilità di usare microsfere dielettriche come
+risuonatori ottici si rendono necessari e potranno essere oggetto di uno 
+studio futuro.
+
+Un sistema sul quale può essere estremamente proficuo applicare questo tipo
+di misurazioni è quello delle giunzioni cellulari, in particolare quelle
+\textit{aderenti} o \textit{serrate}, dove l'interazione tra diverse specie
+di proteine è fondamentale per ottenere un ampia gamma di proprietà meccaniche
+osservabili nei tessuti viventi. In questi sistemi, nonostante la complessità
+e varietà degli effetti macroscopici osservabili, è ancora possibile
+individuare sottoinsiemi di specie di proteine sufficientemente limitati per
+poter essere studiati con un metodo come quello descritto in questo lavoro.
+
+Le giunzioni cellulari presentano ancora molti aspetti incompresi, soprattutto
+manca ancora una accurata descrizione a livello molecolare dei meccanismi
+di interazione responsabili della meccanotrasduzione. Proprio per questo
+motivo rappresentano un ottimo banco di prova per l'applicazione delle
+metodiche descritte.
+
+Per quanto riguarda le \textit{giunzioni aderenti},
+l'osservazione diretta di come il legame tra le proteine \textit{vinculina}
+e $\alpha$\textit{-catenina} possa modulare l'interazione di quest'ultima
+con i filamenti di \textit{actina} potrebbe permettere di determinare il ruolo,
+ancora non chiaro, della \textit{vinculina} nella regolazione delle proprietà
+della giunzione. Una realizzazione sperimentale di questa misura
+è possibile utilizzando l'apparato realizzato e marcando con una sonda
+fluorescente la \textit{vinculina}, mentre allo stesso tempo la cinetica
+dell'interazione actina-$\alpha$\textit{-catenina} viene registrata con il 
+sistema di spettroscopia \textit{force-clamp} (figura \ref{fig:aj_exp}).
+
+Analogamente, nel caso delle \textit{giunzioni serrate}, 
+il ruolo della proteina \textit{cingulina} nel regolare l'attività della
+proteina ZO-1, responsabile di connettere il dominio extra-cellulare della
+giunzione alle strutture di sostegno intra-cellulari, non è ancora
+completamente chiaro.
+In questo caso è possibile ipotizzare, sempre utilizzando l'apparato
+sperimentale realizzato, una misura in cui la cinetica dell'interazione
+tra la proteina ZO-1 (o di un frammento di essa) con filamenti di actina
+viene registrata osservando, contemporaneamente, l'eventuale presenza
+di cingulina marcata con sonde fluorescenti in prossimità della regione
+di interazione.
+
+In conclusione, si ritiene che l'approccio sperimentale descritto in questa
+tesi abbia le caratteristiche necessarie per rispondere ai quesiti ancora
+aperti sul funzionamento, a livello molecolare, di diversi meccanismi
+di \textit{meccanotrasduzione}, e possa fornire misure quantitative sul
+rapporto tra forze esterne applicate, cinetiche di interazione e regolazione
+delle funzioni cellulari.
 
-Un sistema particolarmetne appropriato per essere indagato attraverso
-questo tipo d