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@ -355,7 +355,7 @@ irreversibile (vedi figura \ref{fig:biotin-streptavidin}). |
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\begin{figure}[ht] |
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\begin{figure}[ht] |
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\centering |
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\centering |
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\includegraphics[width=0.5\linewidth]{images/biotin-streptavidin.pdf} |
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\includegraphics[width=0.5\linewidth]{images/biotin-streptavidin.pdf} |
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\caption{Manipolazione di una proteina target utilizzando una |
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\caption{Manipolazione di una proteina bersaglio utilizzando una |
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microsfera intrappolata e il legame biotina-streptavidina.} |
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microsfera intrappolata e il legame biotina-streptavidina.} |
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\label{fig:biotin-streptavidin} |
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\label{fig:biotin-streptavidin} |
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\end{figure} |
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\end{figure} |
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@ -811,4 +811,32 @@ in microscopia di fluorescenza, $\lambda_0 = \SI{532}{\nm}$, e |
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un angolo di incidenza $\theta_c \approx \SI{62}{\degree}$, |
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un angolo di incidenza $\theta_c \approx \SI{62}{\degree}$, |
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otteniamo una profondità di penetrazione $d_p$ di circa \SI{300}{\nm}. |
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otteniamo una profondità di penetrazione $d_p$ di circa \SI{300}{\nm}. |
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Questi numeri ci danno un'idea del limiti di applicazione del campo |
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di applicazione della microscopia TIRF. Quando è necessario |
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individuare fluorofori che si trovano a una profondità maggiore |
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di poche centinaia di nanometri rispetto al vetrino coprioggetti |
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questa tecnica non è più utilizzabile. |
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Per ottimizzare il rapporto segnale/rumore quando si deve lavorare |
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a profondità maggiori è stata sviluppata un'altra tecnica, la HILO, |
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che sfrutta le proprietà della rifrazione per comprimere lo spessore |
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di campione illuminato. |
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\subsection{HILO} |
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\subsection{HILO} |
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La microscopia a fogli di luce altamente inclinati |
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(\textit{Highly Inclined Laminated Optical Sheet microscopy}, HILO) |
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permette, analogamente alla TIRF, di illuminare uno spessore |
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ridotto del campione. |
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\begin{figure}[ht] |
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\centering |
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\includegraphics[width=\linewidth]{images/hilo.pdf} |
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\caption{Schema di illuminazione HILO. Effetto |
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della rifrazione sulla dimensione del fascio (a sinistra) e |
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relazione tra quota del campione illuminata e spostamento |
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orizzontale del fascio (a destra).} |
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\label{fig:hilo} |
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\end{figure} |
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