From 193e5b2b0a4632bf2e15dd4114914d7a1bd06a8f Mon Sep 17 00:00:00 2001 From: "lorenzo.zolfanelli93" Date: Fri, 28 Aug 2020 02:54:20 +0000 Subject: [PATCH] Update on Overleaf. --- chapters/3-methods.tex | 30 ++++++++++++++++++++++++++++++ 1 file changed, 30 insertions(+) diff --git a/chapters/3-methods.tex b/chapters/3-methods.tex index f21e48d..dd11d49 100644 --- a/chapters/3-methods.tex +++ b/chapters/3-methods.tex @@ -572,6 +572,36 @@ della regione illuminata è ridotta al \SI{17}{\percent} (figura \ref{fig:flatfi \label{fig:flatfield} \end{figure} +La densità di potenza che si riesce ad ottenere sul campione risulta intorno ai +\SI{100}{\W\per\square\cm}. + +Per poter rilevare e localizzare singoli fluorofori è necessario ottenere +un rapporto segnale/rumore molto elevato. +I fotoni emessi da una singola molecola sono relativamente pochi e tutte +le sorgenti di fotoni spuri che potrebbero raggiungere il rilevatore +devono essere soppresse nel miglior modo possibile. +I componenti ottici usati nell'apparato, le strutture di sostegno +del microscopio, i vetrini usati per preparare i campione e i solventi usati +possono essere deboli sorgenti di fluorescenza ed emettere fotoni +alle stesse lunghezze d'onda raccolte. +Per questo motivo è di particolare importanza isolare spazialmente i diversi +cammini ottici nell'apparato, minimizzare la diffusione della luce riducendo +il diametro dei fasci a quello necessario, prestando particolare cura al +perfetto allineamento e centraggio di ogni componente e inserendo elementi +assorbenti di separazione quando possibile. +Lo spettro di emissione del laser utilizzato per il fascio di eccitazione +deve essere il più pulito possibile, infatti eventuali componenti residue +vicine alla finestra di emissione del fluoroforo possono portare a un aumento +della luce retrodiffusa dal campione nel cammino di raccolta, aumentando +significativamente il rumore all'aumentare della potenza del laser. +Per questo motivo, visto che le sorgenti che abbiamo a disposizione +sono economici + + + + + + \section{TIRF e illuminazione a modi di galleria} \label{sec:gallery_mode}